NK培养基产品特点：

　　1、培养性能*，支持高密度NK细胞培养；

　　2、可以培养纯度比较低的细胞样品，培养获得高纯度的NK细胞（CD56+/CD3-）；

　　3、如果培养时添加病人自体血浆，效果更为显著；

　　4、经过微生物检测（细菌、真菌、霉菌及支原体）、pH检测、渗透压和内毒素检测；

　　5、不含任何动物源的蛋白成分。

　　NK培养基培养操作步骤

　　1、培养皿的包被：按一个10-cm培养皿的表面积计算，将2mlAdvCell细胞垫(BCP0001)与20lAdvCellNK细胞附物(BNKA001)混合后加入培养皿中，4℃下包被过夜。

　　2、按常规免疫细胞培养的一般准则，如需在生物反应器或培养袋中高密度培养，应优化条件来确定操作步骤。使用前将BNSFM0001中的5种组分按如下体积比在37℃下解冻之后混合混合成*培养基:500mlAdvCell免疫细胞基本培养基（BICBM0001）、20mlAdvCell免疫细胞添加物A（BICS0001A）、1mlAdvCell免疫细胞添加物B（BICS0001B）、1mlAdvCellNK细胞添加物A(BNKS001A)、1mlAdvCellNK细胞添加物B(BNKS001B)。

　　3、抽取患者外周血50ml，将采集的血样转入50ml离心管，2000rpm离心10min。离心结束后，用移液器吸取上层淡黄色血清于新的50ml离心管，盖好离心管盖于40℃水浴锅中孵育30min。孵育结束后，再1400rpm(340g)离心10min,吸取上清于新的离心管保存4℃备用。

　　4、用移液管将下层的血细胞与生理盐水1:1混匀，按1：1将悬液缓慢加入装有淋巴细胞分离液的离心管（注意：不要打乱液面分界保持液面分层明显）。将离心机的升速与降速调至低，400g离心30min；离心结束后，用5ml移液管吸取中间白膜层于新的50ml离心管，并用生理盐水洗涤离心两次，以去除多余血细胞。

　　5、根据计数结果调整细胞浓度，充分混匀后按1-2×106/ml密度接种于含免疫细胞基本培养基（BICBM0001）的培养瓶中，并按10-cm培养皿的表面积添加20lAdvCellNK细胞添加物B（BNKS001B）。当细胞生长到第三天离心换液（340g离心10min）更换新鲜培养基及AdvCellNK细胞添加物B。

　　6、以后4-6天每天镜检观察，根据细胞悬液颜色添加培养液，每次添加应为总体积的三分之一左右。第七天计数，当细胞量大于6×107时，则添加AdvCellNK细胞添加物B；如细胞数量在3-6×107时，则长至第八天添加AdvCellNK细胞添加物B，加液时使总细胞浓度保持在1-1.5×106cell/ml。

　　7、当培养液体积大于150ml或细胞数量大于1.5×108时则需转移至培养袋培养（气泡尽量排空，以免影响细胞生长）。第8-11天每天镜检观察计数，根据细胞悬液颜色加培养液。第12-14天观察需加液时，细胞浓度需保持在2×106cell/ml。当细胞达到所需剂量时，即可离心收集细胞待用。

　　以上就是NK培养基的产品特点和七个培养步骤介绍，给大家参考，并希望有所帮助！