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间充质干细胞无血清培养基P04-77350K适用于造血干细胞培养,即用型PowerStem HPSC。
间充质干细胞无血清培养基P04-77350K储存方法:2-8℃
应用:
应用于人来源的T细胞培养扩增,培养基需要添加刺激性抗体和细胞因子,另外每升培养基需要添加20ml 200mM的L。
操作:
平板培养:
1. 按照已确定的方法来准备新鲜或者冻存的 PBMNCs (外周血单个核细胞)
2. 用血计数器计数细胞数量
3. 转移适当数量的细胞到含有培养基(已加入细胞因子和刺激抗体)的培养瓶中
4. 把培养瓶放入培养箱中, 37°C , 5% CO2 培养.
产品特性:
Nobimpex 无血清 T 细胞培养基 (Product number N103-1000) 已经经过严格的测试可用于 PBMNC 中的 T 细胞扩增。本产品已与其他几种商业化可用的无血清培养基做了 T 细胞扩增比较。实验中,200,000 PBMNCs/ml 在本产品和另一商业化培养基中培养 7 天,培养基含有 100 IU/ml IL-2 和 anti-CD3 (OKT3, 20ng/ml) 抗体。.
实验中扩增的 T-细胞使用 51 铬释放分析来测试细胞溶解能力。靶细胞 (K562, 人慢性白血病细胞), 使用 51 铬标记并连接到 anti-CD3 (OKT3) Fc 受体.。当与效应或者细胞毒 T 细胞混合时,,靶细胞就会凋亡或者溶解,并释放 51 铬.。上清中 51 铬的释放量与靶细胞的死亡及功能 T 细胞的数量成正比。